實(shí)驗(yàn)案例
2024/3/26 9:12:23
冷凍研磨儀對(duì)裸鼠腫瘤組織塊研磨提取樣品蛋白實(shí)驗(yàn)分享
來(lái)源：上海凈信
樣品介紹：荷瘤小鼠就是被移植了腫瘤的小鼠，即腫瘤小鼠模型。活躍于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域的研究工作中。尤其在免疫生物學(xué)、免疫病理學(xué)、腫瘤免疫、病毒免疫等領(lǐng)域。在短短的數(shù)年中，就展開(kāi)了一系列富有成效的新的研究，推動(dòng)了各方面的工作，為實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)、實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤學(xué)提供了新的有效的工具。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>通過(guò)對(duì)裸鼠腫瘤組織的研磨，提取樣品中的蛋白;再驗(yàn)證通過(guò)外泌體干預(yù)的荷瘤鼠模型中，腫瘤的基因表達(dá)情況是否與蛋白測(cè)序結(jié)果一致。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：
冷凍研磨儀 JXFSTPRP-CLN-48
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
將小鼠通過(guò)注射麻醉劑慢慢失去知覺(jué)后，對(duì)小鼠進(jìn)行解剖取小鼠身上的腫瘤塊。
取下腫瘤塊后在將腫瘤塊剪切成綠豆大小的塊狀，可先放入液氮或者-80℃的冰箱中方便后期研磨。
冷凍研磨儀開(kāi)機(jī)，先將儀器制冷功能打開(kāi)，溫度設(shè)置成-20℃，保證樣品在研磨時(shí)蛋白不會(huì)發(fā)生裂解。
研磨儀預(yù)設(shè)溫度達(dá)到后，將剛剛?cè)『眉羟泻蟮臉悠贩湃胙心ス苤校總€(gè)研磨管盡量放100mg左右，再往研磨管中加入4顆研磨珠，再加入蛋白提取液蓋上研磨管蓋，進(jìn)行濕磨。將研磨管放入適配器中，適配器再固定到研磨儀上。
設(shè)置研磨儀參數(shù)，設(shè)置好研磨頻率和時(shí)間，研磨次數(shù)2次，研磨中斷時(shí)間15s，經(jīng)過(guò)研磨后，再進(jìn)行蛋白的提取。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：樣品經(jīng)研磨后提取的蛋白含量充足。
樣品研磨前后效果圖
注意事項(xiàng)：
1、研磨管放到適配器上，一定要注意研磨管的平面配平，否則會(huì)損壞研磨儀的寶塔。
2、適配器在放到研磨儀寶塔上時(shí)，固定螺母一定要固定緊，否則既會(huì)損壞研磨儀寶塔，還會(huì)對(duì)適配器底部造成損壞。
樣品介紹：
冷凍研磨儀能在非常短的時(shí)間內(nèi)將土壤、植物和動(dòng)物的組織，器官等樣品完成研磨、粉碎。隨著近代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，特別是腫瘤學(xué)和免疫學(xué)的需要，動(dòng)物組織的研磨已經(jīng)成為了實(shí)驗(yàn)室不可缺少的一個(gè)環(huán)節(jié)。JXFSTPRP-CLN-48低溫研磨樣品，實(shí)現(xiàn)無(wú)交叉污染的同時(shí)，低溫研磨樣品能夠有效抑制核酸降解、保留蛋白質(zhì)活性。是實(shí)驗(yàn)室樣品前處理的好幫手。
