2024/3/26 9:12:23
冷凍研磨儀對裸鼠腫瘤組織塊研磨提取樣品蛋白實驗分享
來源：上海凈信
樣品介紹：荷瘤小鼠就是被移植了腫瘤的小鼠，即腫瘤小鼠模型。活躍于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等各個領(lǐng)域的研究工作中。尤其在免疫生物學(xué)、免疫病理學(xué)、腫瘤免疫、病毒免疫等領(lǐng)域。在短短的數(shù)年中，就展開了一系列富有成效的新的研究，推動了各方面的工作，為實驗免疫學(xué)、實驗?zāi)[瘤學(xué)提供了新的有效的工具。
實驗?zāi)康模?/strong>通過對裸鼠腫瘤組織的研磨，提取樣品中的蛋白;再驗證通過外泌體干預(yù)的荷瘤鼠模型中，腫瘤的基因表達(dá)情況是否與蛋白測序結(jié)果一致。
實驗設(shè)備：
冷凍研磨儀 JXFSTPRP-CLN-48
實驗過程：
將小鼠通過注射麻醉劑慢慢失去知覺后，對小鼠進(jìn)行解剖取小鼠身上的腫瘤塊。
取下腫瘤塊后在將腫瘤塊剪切成綠豆大小的塊狀，可先放入液氮或者-80℃的冰箱中方便后期研磨。
冷凍研磨儀開機，先將儀器制冷功能打開，溫度設(shè)置成-20℃，保證樣品在研磨時蛋白不會發(fā)生裂解。
研磨儀預(yù)設(shè)溫度達(dá)到后，將剛剛?cè)『眉羟泻蟮臉悠贩湃胙心ス苤校總€研磨管盡量放100mg左右，再往研磨管中加入4顆研磨珠，再加入蛋白提取液蓋上研磨管蓋，進(jìn)行濕磨。將研磨管放入適配器中，適配器再固定到研磨儀上。
設(shè)置研磨儀參數(shù)，設(shè)置好研磨頻率和時間，研磨次數(shù)2次，研磨中斷時間15s，經(jīng)過研磨后，再進(jìn)行蛋白的提取。
實驗結(jié)果：樣品經(jīng)研磨后提取的蛋白含量充足。
樣品研磨前后效果圖
注意事項：
1、研磨管放到適配器上，一定要注意研磨管的平面配平，否則會損壞研磨儀的寶塔。
2、適配器在放到研磨儀寶塔上時，固定螺母一定要固定緊，否則既會損壞研磨儀寶塔，還會對適配器底部造成損壞。
樣品介紹：
冷凍研磨儀能在非常短的時間內(nèi)將土壤、植物和動物的組織，器官等樣品完成研磨、粉碎。隨著近代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，特別是腫瘤學(xué)和免疫學(xué)的需要，動物組織的研磨已經(jīng)成為了實驗室不可缺少的一個環(huán)節(jié)。JXFSTPRP-CLN-48低溫研磨樣品，實現(xiàn)無交叉污染的同時，低溫研磨樣品能夠有效抑制核酸降解、保留蛋白質(zhì)活性。是實驗室樣品前處理的好幫手。
